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Chromatographie échangeuse d'ions

Posté par
fa911662
27-03-17 à 18:58

Bonjour à tous,

J'ai effectué en laboratoire une chromato de deux acides aminés (chromatographie échangeuse de cation). Le second acide aminé a été retenu sur la colonne et est donc le dernier à sortir. Le point sur lequel je bloque est le fait que  nous avons utilisé le même tampon d'elution durant toute la manip. Je sais que les interactions entre l'acide aminé et la résine ne sont pas des interactions covalante mais qu'est ce qui permet au final d'éluer le second acide aminé. Est-ce que le simple fait du passage du mélange tampon peut entraîner l'acide aminé mais dans ce cas ils n'aurait pas été retenu durant toute la manip et nous n'avons pas utilisé d'autres réactifs. Nous avons travailler avec une résine sulfonyl (SO3H)et un tampon citrate 0.1 M ph = 6.0. Je me suis dit que peut-être a force de l'ajout de tampon nous avons reprotonné la résine et donc fait disparaître sa charge ..ce qui expliquerait ça



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